Western Blot即蛋白免疫印迹,是根据抗原抗体的特异性结合检测样品中目的蛋白的方法。这种技术是把SDS-PAGE电泳分离的蛋白组分从凝胶转移到一种固相载体(如PVDF或NC膜)上,以针对某种或某类蛋白的特异性抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应,再与酶标记的第二抗体反应...
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酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)于1971年由Engvall和Perlmann创建成功,成为继免疫荧光和放射免疫之后。又一具有重大意义和深远影响的免疫技术。ELISA技术利用蛋白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,将抗原-抗体特异性反应固定于固相载体表面进行,同时结合酶对底物的高...
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TAP/MS是由Co-IP/MS以及GST Pull down-MS发展而来,三者在寻找鉴定目标蛋白的相互作用蛋白的原理以及方法上非常相似,流程以及效果都要优于酵母双杂交方法。但是,TAP/MS方法经过两步亲和纯化,而Co-IP/MS以及GST Pull down-MS都只是一步亲和纯化,所以TAP/MS相比可以有效减少非特异性蛋白的结合,假...
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蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST pull-down原理是将靶蛋白与GST融合表达,并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过电泳分析,从而...
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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗...
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原核表达即将动、植物的目标靶基因片段连接至合适的原核表达载体中,并转化进入原核细胞,随后利用细菌自身的蛋白质表达系统进行目标蛋白质的重组表达。原核表达系统是远今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统,其优点是实验周期短、成本低、产量高。赢润生物在原核表达及蛋白纯化方面具有丰富的经验,可提...
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