划痕实验

细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

实验内容：

材料：6 孔板（其他多孔板亦可，但6孔较好，大小适中）、marker笔、直尺、20微升枪头（灭菌）、无血清培养基、PBS

步骤：所有操作器械都要提前灭菌，直尺和marker笔在操作前用紫外照射30min（超净台内）

1．先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

2．在孔中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞大小及特性的不同来设定，掌握为过夜能铺满孔板为宜。

3．第二天用枪头比着直尺进行划痕，直尺尽量垂直于背后的横线，枪头要垂直，不能倾斜。

4．用PBS洗3次，去除划落的细胞，然后加入无血清培养基。

5．放入37度5% CO2培养箱中进行培养。之后按0，6，12，24小时取样，拍照。
 

注意事项：

1. 一般做划痕实验，都是在无血清或者低血清状态下培养的，否则细胞本身的增殖情况就不能忽略。

2. 按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点，这就解决了前后观察时位置不固定的问题。

实验图实例：