3‘UTR报告基因克隆构建
miRNA是一类具有调控功能的非编码小RNA,主要通过与靶基因mRNA 3’UTR完全或不完全互补配对而调控靶基因的表达。将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面, 再把相关的miRNA过表达或者干扰操作,便可以根据报告基因表达的改变(监测荧光素酶的活性变化)探究miRNA对目的基因的抑制作用;结合定点基因突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。
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