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cas9/sg质粒构建

发布时间:2017-02-03 [返回]

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)规律间隔成簇短回文重复序列本身是一种防御系统,用以保护细菌和古细菌细胞不受病毒的侵害。在这些生物基因组中的CRISPR位点能表达与入侵病毒基因组序列相匹配的小分子RNA 。当微生物感染了这些病毒中的一种,CRISPR RNA就能通过互补序列结合病毒基因组,并表达CRISPR相关酶,也就是Cas,这些酶都是核酸酶,能切割病毒DNA ,阻止病毒完成其功能。

Cas9酶受sgRNA引导靶向切割DNA双链的分子机制

该切割DNA的机制与2012年被证实广泛适用于真核生物,从而引发了后续的以CRISPR/Cas9为基础的第三代基因编辑工具的研究热潮。在真核细胞中双链的DNA打断(Double strand break, DSB)可以引发两种修复机制,其中非同源末端结合(Non-homologous end joining, NHEJ)可以产生数个碱基的随机删除或插入,从而引发移码突变,这便是基因编辑工具进行基因敲除的原理;此外在有同源序列存在时可以进行同源重组修复,该机制可以实现外源基因的敲入或者定点修饰。


CRISPR/Cas9载体构建服务优势

本公司提供的质粒均来源于最新的顶尖杂志中已使用过的系统,其有效性已被反复被验证。

靶点的筛选: 不同靶点的有效性存在差异,本公司免费为您设计三个特异性靶点。

载体系统的构建:常规CRISPR系统、lentiCRISPR系统等,根据客户的不同需要,提供个性化载体构建服务。


客户须知

  1. 客户可根据后续实验需求选择合适的系统进行CRISPR/Cas9载体定制服务。
  2. 客户需要提供外显子序列或者基因登陆号。

CRISPR gRNA 载体

服务承诺

  1. 上服务价格均为单个靶点设计的CRISPR/Cas9系统,并不保证所选靶点的切割效率,建议同时购买三个靶点以筛选出最优靶点;
  2. 提交的结果包含第三方测序报告,序列准确无误,确认提供的质粒和第三方测序结果一致;
  3. 利用荧光显微镜来检测CRISPR/Cas9载体活性,细胞荧光表达情况的强弱可以反应靶点的有效性。
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