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BL21(DE3)感受态细胞 



产品说明

BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存几月转化效率不发生改变。 

BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白。该菌株是以T7 RNA 聚合酶为表达系统的外源基因蛋白高效表达的宿主。T7 噬菌体RNA 聚合酶基因的表达受λ噬菌体DE3区的lacUV5 启动子调控,该区整合在BL21 染色体上。本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。使用pU19持粒检测,转化效率可达107。

基因型:fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ∆hsdS λ DE3 = λ sBamHIo ∆EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ∆nin5

产品特点

1.转化效率可达107

2.可用于非毒性蛋白表达。

3.长时间保存于-80 ℃,转化效率不发生改变

包装清单

产品编号

名称

规格

价格

备注

T2031

BL21(DE3)感受态细胞

20×0.05ml

600

 

操作步骤

1.取感受态细胞置于冰浴中,放置10分钟。

2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA,轻轻地敲打4-5下。

3.冰浴30分钟,不要震荡。

4.42℃热击45秒,不要震荡,迅速转移到冰浴中,放置2分钟。

5.加入250μl室温的SOC培养基。

6.混匀后,置于37℃的摇床上,250rpm震荡培养60min

7.将含有抗生素的平板加热到37℃,放置半个小时,使其表面干燥,易于均匀涂布。

8.根据实验要求,取适量转化的感受态的细胞,加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上(LBSOC),用无菌棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃培养箱,倒置过夜培养(8-12h)。

运输和储藏

干冰运输,收到后请置于-80℃。

注意事项

1.刚刚融化的细胞,转化效率最高

2.避免反复冻融

3.避免用移液枪吸吹

4.整个操作过程要轻柔


 

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