产品说明
大肠杆菌Stabl3是由大肠杆菌HB101衍生出来的菌种。该菌种适合于不稳定的片段的克隆,比如包含正向重复的慢病毒。使用pUC19质粒进行检测,转化效率可达1×108cfu/μg以上。基因型:F–mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5λ– leu mtl-1。
产品特点
1.适合于慢病毒以及其他逆转录病毒载体的复制。
2.有效降低错误重组。
包装清单
产品编号 |
名称 |
规格 |
价格 |
备注 |
T2011 |
Stabl3感受态细胞 |
20×0.05ml |
600元 |
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操作步骤
1.取感受态细胞置于冰浴中,放置10分钟。
2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA,轻轻地敲打4-5下。
3.冰浴30分钟,不要震荡。
4.42℃热击30秒,不要震荡,迅速转移到冰浴中,放置2分钟。
5.加入250μl室温的SOC培养基。
6.混匀后,置于37℃的摇床上,250rpm震荡培养60min。
7.将含有抗生素的平板加热到37℃,放置半个小时,使其表面干燥,易于均匀涂布。
8.根据实验要求,取适量转化的感受态的细胞,加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上(LB或SOC),用无菌棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃培养箱,倒置过夜培养(8-12h)。
运输和储藏
干冰运输,收到后请置于-80℃。
注意事项
1.刚刚融化的细胞,转化效率最高
2.避免反复冻融
3.避免用移液枪吸吹
4.整个操作过程要轻柔