载体用途:哺乳动物表达载体
原核抗性:Ampicillin(氨苄青霉素)
真核筛选标记:Neomycin / G418
启动子:CMV promter
标签:C端带V5标签
表达水平:高
克隆方法:Gateway重组
5' 测序引物:CMV-f
3' 测序引物:V5 Reverse(5'-ACCGAGGAGAGGGTTAGGGAT-3')
载体拷贝数:高
备注:pcDNA3.2/V5-DEST是Gateway系统载体,不能单独使用,需要与供体载体、入门载体配套使用。
1. pcDNA3.2/V5-DEST空载上,CMV启动子后有ccdB表达框,所以此空载体只能在DB3.1等专用的大肠杆菌中才能复制扩增,使用此载体时,请注意配套相应的DB3.1感受态(赢润生物YRgene有售)。当外源基因成功插入,ccdB表达框将被置换掉,此时,重组质粒可以在DH5α、TOP10等常规大肠杆菌中扩增复制。 2. pcDNA3.2/V5-DEST是Gateway系统载体,不能单独使用,需要与供体载体、入门载体配套使用。 3. Gateway系统哺乳动物表达载体选择指南: pDEST12.2:不带标签。 pDEST26:N-His标签,G418筛选。 pDEST27:N-GST标签,G418筛选。 pDEST40:C-His标签、C-V5标签,G418筛选。 pcDNA-DEST40:C-His标签、C-V5标签,G418筛选。 pcDNA-DEST47:C-绿色荧光蛋白,G418筛选。 pcDNA-DEST53:N-绿色荧光蛋白,G418筛选。 pcDNA3.2/V5-DEST:C-V5标签,G418筛选。 pcDNA6.2/V5-DEST:C-V5标签,Blasticidin S筛选。 pcDNA6.2/N-YFP-DEST:N-黄色荧光蛋白,Blasticidin S筛选。 pcDNA6.2/N-EmGFP-DEST:N-绿色荧光蛋白,Blasticidin S筛选。 pcDNA6.2/C-YFP-DEST:C-黄色荧光蛋白,Blasticidin S筛选。 pcDNA6.2/C-EmGFP-DEST:C-绿色荧光蛋白,Blasticidin S筛选。 pcDNA6.2/BioEase-DEST:N-生物素,Blasticidin S筛选。