基因敲除细胞系服务
技术简介
规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)是一类广泛分布于细菌基因组中的重复结构,经转录并加工成短的crRNA(CRISPR-derived RNA)。后者与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成的复合物能特异识别靶DNA序列,引导内切酶Cas 9(CRISPR-associated protein 9)在该位置上进行切割。来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统就是在RNA引导下,Cas9核酸酶在PAM位点(5’-NGG-3’)附近对目的基因进行切割,实现基因定点修饰的基因编辑技术。该技术中使用的是将crRNA和tracrRNA连接起来作为引导RNA(gRNA,guide-RNA)。
实验流程图
您需要提供:
1.目的基因相关信息
2.需要构建的细胞系相关信息
服务内容:
1. 靶向目标序列gRNA的设计及载体构建
2. 质粒大提
3. 目标细胞系共转染
4. 阳性细胞株的筛选和鉴定